Ligamentum flavum hipertrofisi olan ve olmayan hastalarda COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-1 beta, IL-6, IL-1 alfa gen ekspresyonlarının araştırılması
Özet
Lomber spinal dar kanal (LSDK), yaşlı populasyondaki en sık omurga bozuklarından
birisidir. Ligamentum flavum (LF) hipertrofisi LSDK etyopatogenezinde önemli bir rol
oynamaktadır. İnflamatuar ajanların ligamentum flavum hipertrofisine ve artmış skar dokusu
oluşumuna sebep olmaktadır.
Bu projenin amacı histopatolojik olarak hipertrofiye uğramış ligamentum flavum
dokusunda, inflamatuar süreci etkileyen genler olan COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-1
beta, IL-6, IL-1 alfa’ nın histopatolojik olarak normal olan ligamentum flavum dokusuna
göre ekspresyonunun değişimini araştırmaktır.
Operasyon esnasında kontrol grubu 25 lomber dar kanal ve 25 lomber disk herniasyon tanısı
olan kontrol grubundan alınan ligamentum flavum örnekleri histolojik çalışma için elde
edilmiştir. Masson trichrome boyasıyla LDH ve LSDK gruplarında fibrozis
derecelendirmesi yapılmıştır. LSDK ve LDH gruplarından alınan ligamentum flavum
örneklerinin bir kısmında inflamatuar sitokinlerin, COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-1 beta,
IL-6, IL-1 alfa genlerinin RNA izolasyonu yapıldı. İzole edilen RNA moleküllerinin kalitatif
ve kantitatif analizleri sonrasında cDNA sentezi gerçekleştirildi. Semikantitatif RT-PCR
yöntemi ile COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-1 beta, IL-6, IL-1 alfa ve housekeeping gen
olarak kullanılan alfa aktin’ nin ifadelenmesi analiz edildi.
LSDK ve LDH gruplarında bu sitokinlerin ifadelendiğini gördük. LSDK ve LDH grubunda
COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-6 ve IL-1 alfa’ nın benzer şekilde ifadelenmesine rağmen,
LSDK grubunda LDH grubuna göre IL-1 beta’ nın baskılandığını tespit ettik.
İnflamatuar sitokinlerin ligamentum flavum hipertrofisindeki etkileri açıklığa
kavuşturulmalıdır.
Lumbar spinal canal stenosis (LSCS) is one of the most common spinal disorders in elderly.
Ligamentum flavum (LF) hypertrophy plays a critical role in the pathogenesis of LSCS.
Inflammatory agents induce the LF hypertrophy and increased scar tissue formation. This
project aims to investigate the expression of genes (COX-2, IL-15, IL-8, TNF-alfa, IL-1
beta, IL-6, IL-1 alfa) that are responsible for the inflammatory process in hypertrophied LF
tissue histopathologically and to compare with the normal LF tissue population.
In our study, 25 samples of hypertrophied LF tissue were obtained from the patients with the
diagnosis of LSCS while 25 samples were obtained from the patients who underwent surgery
for lumbar disc herniation forming control group. Some of these samples were investigated
for histological study. They were stained with Masson trichrome for analysis and grading of
fibrosis. Furthermore, the rest of the LF samples in the LSCS and control groups were
investigated for the expression of inflammatory cytokine genes (COX-2, IL-15, IL-8, TNFalpha,
IL-1beta, IL-6, IL-1 alpha gene) by RNA isolation. Following the qualitative and
quantitative analysis of isolated RNA molecules, cDNA synthesis were carried out. COX-2,
IL-15, IL-8, TNF-alpha, IL-1beta, IL-6, IL-1 alpha and housekeeping gene alpha aktin were
analyzed for the expression levels by semiquantitative RT-PCR method.
Cytokines were found both in LSCS and control groups. Any statistically significant
difference was not found between LSCS and control groups in terms of COX-2, IL-15, IL-
8, TNF-alpha, IL-6 and IL-1 alpha. However, low levels of IL-1 beta was found in LSCS
group.
The effects of inflammatory cytokines in the pathogenesis of ligamentum flavum
hypertrophy should be clarified.